A prova cruzada ou “cross-match” por Citometria de Fluxo é uma técnica com alta sensibilidade na detecção de anticorpos anti-HLA de baixo título e é empregada para avaliar se o receptor não é sensibilizado contra os Antígenos de histocompatibilidade do doador (ainda que seja seu primeiro transplante), o que deve resultar negativa. Esta avaliação é realizada através de um ensaio “in vitro” no qual uma amostra de soro do receptor é misturado com linfócitos do doador e incubados por um período. Após a incubação, durante a qual deve ocorrer a formação de complexo antígeno-anticorpo (se no soro houver a presença de anticorpos anti-HLA), adiciona-se a reação, anticorpos monoclonais marcados com fluorescência direcionados aos linfócitos T e B, na qual será detectado pelo Citometro de Fluxo a reação positiva ou negativa. Na reação positiva, uma vez que existem anticorpos específicos anti-doador em circulação, se for realizado um transplante, este poderá ser rapidamente rejeitado. A reação de “cross-match” positiva pode ser observada em pacientes que foram submetidos a transfusões múltiplas, mulheres multíparas ou indivíduos que já foram previamente transplantados. Este exame também pode ser realizado com a finalidade de investigação de abortos de repetição.